，液體蒸發(fā)又冷凝，PCR管中部分空氣形成氣溶膠，攜帶大量的DNA擴增產物(注意，1ng擴增產物中可作為模板的DNA片段數(shù)量，超過1ng起始模板中可擴增DNA片段數(shù)量的幾百萬倍甚至更高。比如人的基因組DNA有30億個bp，要擴增的單拷貝基因片段是300bp，1ng起始模板中可以作為模板DNA片段只占總起始模板DNA總量的千萬分之一)。如果在實驗室打開含PCR擴增產物的管蓋，大量攜帶DNA擴增產物的氣溶膠就會涌出，擴散到空氣中，從而對環(huán)境造成污染。

雖然在整個空間環(huán)境中DNA的含量很低，但由于理論上只要有1個可做為模板的DNA片段也能PCR擴增成功

，這就是為什么在污染環(huán)境中陰性對照也能擴增出條帶的原因。

所以在專業(yè)的PCR實驗室(比如臨床PCR檢驗實驗室)，通常有四區(qū)隔離(或至少是三區(qū)隔離)的要求

。

常見的三區(qū)是指：

1

、試劑配制區(qū)：PCR反應體系的配制區(qū)域。

2

、標本處理區(qū)：包括擴增模板的制備，即提取DNA的地方。

3

、PCR擴增和產物分析區(qū)：進行PCR擴增的區(qū)域，也是擴增產物進行凝膠電泳分析的區(qū)域。

如果將PCR擴增區(qū)域和產物分析區(qū)再次分開

，就是四區(qū)隔離。四區(qū)隔離，主要目的是防止氣溶膠在各個PCR區(qū)域之間的流動，較好的方法是每個區(qū)域隔一幢樓，但操作起來不現(xiàn)實，于是便有了針對不同區(qū)域設置正負壓的方法：

試劑配制區(qū)(Ⅰ區(qū))：較潔凈的區(qū)域

，保持微正壓使得外界空氣無法進入隔離污染源。并且陰性模板應該在此區(qū)加入PCR管并蓋蓋，嚴禁在此區(qū)域打開、存放裝有DNA模板的離心管